Fatores a serem Considerados ao selecionar um Microscópio de Pesquisa

Resolução do microscópio: conceitos, fatores e cálculo

Fatores a serem Considerados ao selecionar um Microscópio de Pesquisa

Qual é o microscópio de pesquisa certo para mim? Este artigo oferece uma breve visão geral dos principais recursos que você deve ter em mente ao escolher um microscópio óptico de pesquisa.

Um microscópio óptico é geralmente um dos dispositivos centrais em um laboratório de pesquisa de ciências biológicas. Ele pode ser usado para várias aplicações que lançam luz sobre muitas questões científicas. Desse modo, a configuração e os recursos do microscópio são cruciais para sua cobertura de aplicação, variando de campo claro, microscopia de fluorescência e imagens de células vivas.

Este artigo fornece uma breve visão geral dos recursos relevantes do microscópio e resume as principais questões que devem ser consideradas ao selecionar um microscópio de pesquisa.

Que tipo de espécime você usa?

Uma das primeiras coisas a se considerar ao selecionar um microscópio de pesquisa é o tipo de espécime que você deseja explorar. Para amostras fixas montadas em uma lâmina de vidro fina, você pode usar um microscópio vertical. As células vivas exigem características especiais do microscópio porque são mantidas em recipientes de cultura de células relativamente grandes, cheios de meios de cultura de células.

Esquerda: Lâmina de vidro para montar amostras fixas, por exemplo, cortes histológicos. À direita: placa de Petri para uso em cultura de células.

Somente uma configuração invertida, com a objetiva abaixo e o condensador acima do corpo de prova, facilita o espaço livre essencial e a proximidade necessária da objetiva ao corpo de prova. Ao mesmo tempo, um microscópio invertido mantém uma boa acessibilidade às células, por exemplo, para adicionar micromanipuladores.

Além disso, as células vivas requerem um ambiente adequado para sobreviver. A temperatura e a concentração de CO ₂ devem ser mantidas em certos níveis. Uma câmara climática com os controladores correspondentes é necessária para cumprir esta tarefa.

Esquerda: um microscópio vertical apresenta a objetiva acima e o condensador abaixo da amostra. Direita: Em um microscópio invertido, esta configuração é invertida, dando aos usuários mais espaço, além da proximidade necessária da objetiva ao espécime.

Em que dimensões você pensa?

Espécime microscópico distribuído em três dimensões: comprimento, largura e altura. Enquanto alguns espécimes, como cortes histológicos, são fotografados apenas na direção xy, existem outras aplicações que exigem aquisição também na dimensão z. Para obter imagens de volumes 3D, por exemplo, de células vivas, um revólver objetivo motorizado é recomendado, que é capaz de guiar sua amostra passo a passo através do foco. O software de imagem deve ser capaz de reconstruir as imagens individuais para visualização 3D.

Para células vivas, você deve adicionar a dimensão tempo. Nesse caso, por exemplo, a estabilidade do sistema é outro recurso crítico. Devido ao fato de que as mudanças de temperatura influenciam o sistema de imagem durante a aquisição, contra-medidas eficazes são essenciais. Um ajuste automático de foco, como o Adaptive Focus Control ( AFC ), neutraliza essas influências térmicas e sempre encontra o foco predefinido.

O Adaptive Focus Control ( AFC ) estabiliza automaticamente o foco do microscópio também durante a aquisição de lapso de tempo de longo prazo. Um sensor detecta movimentos de um feixe de luz LED (850 nm) que ocorrem se a tampa de vidro que transporta a amostra muda de posição, por exemplo, devido à atividade térmica.

Qual método de contraste é mais adequado para sua amostra?

A maioria das células - especialmente células animais - investigadas com um microscópio não tem contraste intrínseco suficiente para ver os detalhes. Os pesquisadores usam métodos de contraste para corrigir esse problema. Enquanto o contraste de fase (PH) e o contraste de interferência diferencial ( DIC ) manipulam a luz que passa pela amostra para adicionar contraste, você também pode tingi-la com corantes fluorescentes ( Imunofluorescência ), respectivamente, usando proteínas fluorescentes .

De acordo com o método de contraste, o microscópio necessita de equipamentos específicos; por exemplo, o contraste de fase precisa de objetivos especiais, enquanto o DIC utiliza certos prismas que devem ser colocados no caminho da luz. Para microscopia de fluorescência, você precisa de cubos de filtro especiais, permitindo que os comprimentos de onda de luz corretos acessem e saiam da amostra.

Série de células neuronais adquiridas com diferentes métodos de contraste. Da esquerda para a direita: campo claro, DIC , contraste de fase, fluorescência

E quanto à fonte de luz?

A escolha do método de contraste também determina a fonte de luz. A iluminação de luz transmitida para microscopia de campo claro convencional, contraste de fase e DIC pode ser realizada com iluminação halógena ou LED . A microscopia de fluorescência pode ser realizada com iluminação LED ou com a ajuda de lâmpadas de mercúrio, xenônio ou haletos metálicos de mercúrio .

Você quer documentar ou publicar seus resultados?

Se você deseja obter uma imagem de seu espécime ou fazer imagens de células vivas, você precisa de uma câmera de microscópio digital . Especialmente no caso de imagens de células vivas por fluorescência, uma câmera sensível é recomendada para minimizar a quantidade de luz de excitação que pode danificar as células. Além das câmeras CCD e EMDDC bem estabelecidas , hoje em dia as câmeras sCMOS surgiram devido à sua alta eficiência quântica e velocidade de aquisição. Para obter mais informações sobre câmeras de microscópio digital, leia o artigo Introdução à tecnologia de câmera digital.

Além disso, um grande campo de visão (FOV) ajuda a encontrar áreas interessantes mais rapidamente e a criar imagens de mais células ao mesmo tempo. Os microscópios de pesquisa modernos apresentam um FOV de 19 mm na porta da câmera que corresponde perfeitamente a um chip de câmera sCMOS de 19 mm.

Você precisa de informações (3D) de amostras espessas?

Amostras espessas são um desafio para a microscopia. Especialmente na microscopia de campo amplo , onde toda a amostra é iluminada ao mesmo tempo, a identificação das características de uma amostra que estão em foco pode ser reduzida drasticamente pela luz adicional proveniente de regiões fora de foco.

A Compensação Computacional pode ajudar a obter imagens sem luz fora de foco. Esta técnica pode ser aplicada em um único plano de imagem para resultados instantâneos (ICC: Instant Computational Clearing) ou pode ser combinada com uma etapa de deconvolução adicional (SVCC: Small Volume Computational Clearing; LVCC: Large Volume Computational Clearing) para resultados ainda melhores . A deconvolução reatribui a informação do fóton à sua origem e, assim, oferece um contraste melhor das estruturas desejadas no plano focal. Isso pode permitir aos usuários distinguir estruturas de interesse do plano de fundo mais facilmente do que com imagens de campo amplo tradicionais.

RNA- FISH de molécula única em tecido canceroso. RNA-01 (verde), RNA-02 (magenta) Esquerda: dados brutos. Meio: Com compensação computacional instantânea. À direita: após compensação computacional de grande volume. Cortesia do Prof. Andreas Moor, Universidade de Zurique (Suíça).

Você quer manipular suas células no microscópio?

Durante os últimos anos, a foto-manipulação do espécime tornou-se popular. Isso significa que os pesquisadores não apenas observam as células vivas, mas também as manipulam com a ajuda da luz. A Recuperação de Fluorescência após Fotodegradação ( FRAP ) é um exemplo que ajuda a desemaranhar processos celulares dinâmicos. Para esses tipos de técnicas de manipulação, muitas vezes são necessárias fontes de luz adicionais, que devem ser integradas ao caminho de luz do microscópio.

Essa abordagem não é trivial. O Leica Infinity Port é uma solução universal que acopla fontes de luz adicionais ao caminho da luz do microscópio sem perturbar a qualidade da imagem, por exemplo , FRAP , foto-comutação, ablação ou optogenética. Com o adaptador certo em mãos, os pesquisadores podem até mesmo acoplar seus dispositivos feitos em casa.

Microscópio de pesquisa invertido Leica DMi8.

Qual é o seu orçamento?

Uma questão importante é quanto dinheiro você pode gastar. Alguns fornecedores de microscópio oferecem configurações predefinidas que são adequadas para aplicações especiais. Mas e se você não precisar de todos os componentes pré-configurados pelos quais paga? É por isso que uma configuração gratuita de componentes pode ser mais barata do que comprar um sistema de microscópio predefinido.

Além disso, os requisitos para um microscópio podem mudar com o tempo. Nesse caso, um sistema atualizável tem certas vantagens. Com uma configuração predefinida e fixa, você pode ficar preso a uma quantidade limitada de aplicativos. A capacidade de atualização dá a você a liberdade de crescer com as novas demandas.

Levando esses pontos em consideração, uma plataforma de microscopia modular, como o Leica DMi8, permite ao pesquisador começar com um sistema de microscópio acessível que pode ser atualizado posteriormente e crescer com suas demandas.

Graças à sua modularidade, o Leica DMi8 pode ser configurado de acordo com as necessidades dos pesquisadores. Além disso, ele pode ser atualizado posteriormente, se os requisitos forem alterados.

Quem usará o microscópio?

A gama de usuários de microscópio pode ser muito heterogênea. Especialmente na universidade, os usuários podem ser muito experientes ou iniciantes. Assim, um sistema de microscópio fácil de usar executado por um software intuitivo , como o Leica Application Suite X ( LAS X ), ajuda a iniciar e adquirir dados rapidamente. Por exemplo, um design orientado para o fluxo de trabalho, assistentes de análise de imagem e uma integração perfeita de periféricos no sistema simplificam seu trabalho.

Além dos microscópios de campo amplo, os microscópios estereoscópicos também são frequentemente usados em laboratórios de pesquisa de ciências biológicas.

Autores: Christoph Greb, Dr. ; Leica Microsystems

Resolução do microscópio: conceitos, fatores e cálculo

Discos Aéreos, Limite de Difração de Abbe e o Critério de Rayleigh

Na microscopia, o termo 'resolução' é usado para descrever a capacidade de um microscópio de distinguir detalhes. Em outras palavras, esta é a distância mínima em que dois pontos distintos de um espécime ainda podem ser vistos - seja pelo observador ou pela câmera do microscópio - como entidades separadas.

A resolução de um microscópio está intrinsecamente ligada à abertura numérica (NA) dos componentes ópticos, bem como ao comprimento de onda da luz que é usado para examinar um espécime. Além disso, temos que considerar o limite de difração que foi descrito pela primeira vez em 1873 por Ernst Abbe.

Este artigo cobre um pouco da história por trás desses conceitos, bem como explica cada um deles usando uma terminologia relativamente simples.

Resolução e abertura numérica

A abertura numérica (NA) está relacionada ao índice de refração (n) de um meio pelo qual a luz passa, bem como a abertura angular (α) de uma determinada objetiva (NA = nx sen α). A resolução de um microscópio não depende apenas do NA de uma objetiva, mas do NA de todo o sistema, levando em consideração o NA do condensador do microscópio. Mais detalhes da imagem serão resolvidos em um sistema de microscópio no qual todos os componentes ópticos estão corretamente alinhados, têm um valor NA relativamente alto e funcionam harmoniosamente uns com os outros. A resolução também está relacionada ao comprimento de onda da luz que é usada para a imagem de um espécime; luz de comprimentos de onda mais curtos são capazes de resolver mais detalhes do que comprimentos de onda mais longos.

Existem três conceitos matemáticos que precisam ser levados em consideração ao lidar com a resolução: 'Limite de difração de Abbe', 'Discos de ar' e o 'Critério de Rayleigh'. Cada um deles é abordado a seguir em ordem cronológica.

George Biddell Airy e 'Airy Discs' (1835)

George Biddell Airy (1801-1892) foi um matemático e astrônomo inglês. Em 1826 (com 25 anos), foi nomeado professor de matemática no Trinity College e, dois anos depois, foi nomeado professor de astronomia no novo Observatório de Cambridge. De 1835 a 1881 ele foi o 'Astrônomo Real' e ele tem uma cratera lunar e marciana nomeada em sua homenagem.

Também no ano de 1835, ele publicou um artigo nas Transactions of the Cambridge Philosophical Society intitulado 'On the Diffraction of an Object-Glass with Circular Aperture'. Airy escreveu este artigo do ponto de vista de um astrônomo e nele ele descreve “a forma e o brilho dos anéis ou raios que cercam a imagem de uma estrela vista em um bom telescópio”. Apesar de escrever em um campo científico diferente, essas observações são relevantes para outros sistemas ópticos e, de fato, o microscópio

Um Airy Disc é o ponto de luz perfeitamente focado que pode ser determinado por uma abertura circular em um sistema perfeitamente alinhado e limitado por difração. Visto de cima (Figura 1), isso aparece como um ponto de luz brilhante em torno do qual estão anéis concêntricos ou ondulações (mais corretamente conhecido como Padrão Aéreo ).

O padrão de difração é determinado pelo comprimento de onda da luz e o tamanho da abertura pela qual a luz passa. O ponto central do Disco Aéreo contém aproximadamente 84% da intensidade luminosa com os 16% restantes no padrão de difração em torno deste ponto. É claro que existem muitos pontos de luz em um espécime visto com um microscópio, e é mais apropriado pensar em termos de vários Padrões Aéreos, em oposição a um único ponto de luz, conforme descrito pelo termo 'Disco Aéreo'.

A representação tridimensional do padrão Airy, conforme ilustrado na metade inferior da Figura 1, também é conhecida como 'Função Point-Spread'.

Fenômeno típico de um padrão de Airy, também conhecido como Airy Disc, com seu ponto central máximo de luz e os anéis difrativos circundantes.

Ernst Abbe e 'Limite de Difração de Abbe' (1873)

Ernst Karl Abbe (1840-1905) foi um matemático e físico alemão e, em 1866, conheceu Carl Zeiss e juntos fundaram o que ficou conhecido como 'Zeiss Optical Works', agora conhecido como Zeiss. Além disso, ele também co-fundou a Schott Glassworks em 1884. Abbe também foi a primeira pessoa a definir o termo abertura numérica . Em 1873, Abbe publicou sua teoria e fórmula que explicava os limites de difração do microscópio. Abbe reconheceu que as imagens dos espécimes são compostas por uma infinidade de pontos sobrepostos, de intensidade múltipla e limitados por difração (ou Discos Aéreos).

A fim de aumentar a resolução (d = λ / 2 NA), o espécime deve ser visualizado usando luz de comprimento de onda mais curto (λ) ou através de um meio de imagem com um índice de refração relativamente alto ou com componentes ópticos que têm um alto NA (ou , na verdade, uma combinação de todos esses fatores).

No entanto, mesmo levando todos esses fatores em consideração, os limites em um sistema de microscópio real ainda são um tanto limitados devido à complexidade de todo o sistema, características de transmissão do vidro em comprimentos de onda abaixo de 400 nm e a obtenção de um NA alto no completo microscópio. A resolução lateral em um microscópio óptico ideal é limitada a cerca de 200 nm, enquanto a resolução axial é de cerca de 500 nm (para exemplos de limites de resolução, consulte abaixo).

John William Strutt e 'The Rayleigh Criterion' (1896)

John William Strutt, 3º Barão Rayleigh (1842-1919) foi um físico inglês e um autor prolífico. Durante sua vida, ele escreveu um número surpreendente de 466 publicações, incluindo 430 artigos científicos. Ele escreveu sobre uma vasta gama de tópicos tão diversos como vôo de pássaros, pesquisa psíquica, acústica e em 1895, ele descobriu o argônio (pelo qual ele mais tarde recebeu o Prêmio Nobel de Física em 1904).

Rayleigh construiu e expandiu o trabalho de George Airy e inventou a teoria do 'Critério de Rayleigh' em 1896. O Critério de Rayleigh (Figura 2) define o limite de resolução em um sistema limitado por difração, em outras palavras, quando dois pontos de luz são distinguíveis ou resolvidas uma da outra.

Usando a teoria dos discos de ar, se os padrões de difração de dois discos de ar simples não se sobrepõem, então eles são facilmente distinguíveis, 'bem resolvidos' e dizem que atendem ao critério de Rayleigh (Figura 2, à esquerda). Quando o centro de um disco de ar é diretamente sobreposto pelo primeiro mínimo do padrão de difração de outro, eles podem ser considerados 'apenas resolvidos' e ainda distinguíveis como dois pontos de luz separados (Figura 2, no meio). Se os Discos Aéreos estiverem mais próximos do que isso, eles não atendem ao Critério de Rayleigh e 'não serão resolvidos' como dois pontos distintos de luz (ou detalhes separados em uma imagem de amostra; Figura 2, à direita).

O limite de resolução (definido pelo Critério de Rayleigh) mostrado pelos padrões de difração sobrepostos de dois discos Airy simples: Esquerda: Bem resolvido - Médio: Apenas resolvido - Direita: Não resolvido

Como calcular a resolução de um microscópio

Levando todas as teorias acima em consideração, é claro que há uma série de fatores a serem considerados no cálculo dos limites teóricos de resolução. A resolução também depende da natureza da amostra. Vejamos como calcular a resolução usando o limite de difração de Abbe e também usando o critério de Rayleigh.

Em primeiro lugar, deve-se lembrar que:

NA = nx sen α

Onde n é o índice de refração do meio de imagem e α é a metade da abertura angular da objetiva. A abertura angular máxima de uma objetiva é de cerca de 144º. O seno da metade desse ângulo é 0,95. Se estiver usando uma objetiva de imersão com óleo que tem um índice de refração de 1,52, o NA máximo da objetiva será 1,45. Se estiver usando uma objetiva 'seca' (sem imersão), o NA máximo da objetiva será 0,95 (já que o ar tem um índice de refração de 1,0).

A fórmula de difração de Abbe para resolução lateral (ou seja, XY) é:

d = λ / 2 NA

Onde λ é o comprimento de onda da luz usada para a imagem de um espécime. Se estiver usando uma luz verde de 514 nm e uma objetiva de imersão em óleo com NA de 1,45, então o limite (teórico) de resolução será 177 nm.

A fórmula de difração de Abbe para resolução axial (ou seja, Z) é:

d = 2 λ / NA ²

Novamente, se assumirmos um comprimento de onda de 514 nm para observar uma amostra com um objetivo de valor NA de 1,45, então a resolução axial será de 488 nm.

O Critério de Rayleigh é uma fórmula ligeiramente refinada com base nos limites de difração de Abbe:

R = 1,22 λ / NAobj + NAcond

Onde λ é o comprimento de onda da luz usada para a imagem de um espécime. NAobj é o NA do objetivo. NAcond é o NA do condensador. A figura de '1,22' é uma constante. Isso é derivado do trabalho de Rayleigh sobre as funções de Bessel. Eles são usados para calcular problemas em sistemas como a propagação de ondas.

Levando em consideração o NA do condensador, o ar (com um índice de refração de 1,0) é geralmente o meio de geração de imagens entre o condensador e a lâmina. Supondo que o condensador tenha uma abertura angular de 144º, o valor NAcond será igual a 0,95.

Se estiver usando uma luz verde de 514 nm, uma objetiva de imersão em óleo com NA de 1,45, condensador com NA de 0,95, então o limite (teórico) de resolução será de 261 nm.

Como afirmado acima, quanto menor o comprimento de onda da luz usada para a imagem de um espécime, mais detalhes serão resolvidos. Assim, se usar o menor comprimento de onda visível da luz de 400 nm, com uma objetiva de imersão em óleo com NA de 1,45 e um condensador com NA de 0,95, então R seria igual a 203 nm.

Para atingir a resolução máxima (teórica) em um sistema de microscópio, cada um dos componentes ópticos deve ser do maior NA disponível (levando em consideração a abertura angular). Além disso, o uso de um comprimento de onda de luz mais curto para visualizar a amostra aumentará a resolução. Finalmente, todo o sistema do microscópio deve ser alinhado corretamente.

Autor: Martin Wilson, PhD

Como higienizar um microscópio

Devido à atual pandemia de coronavírus, há muitas dúvidas em relação aos métodos de descontaminação de microscópios para uso seguro.

Os microscópios são comumente compartilhados por vários usuários, por isso podem apresentar o risco de contaminação por microrganismos. Além disso, os próprios microrganismos podem servir como amostras que são observadas ao microscópio. Assim, uma higienização frequente do microscópio é altamente recomendada. Para evitar infecções, o uso de luvas descartáveis para operação, limpeza e descontaminação do microscópio também é recomendado. Luvas descartáveis podem ser descontaminadas com, por exemplo, álcool, se necessário, ou devem ser trocadas frequentemente para minimizar o risco de contaminação.

Agentes infecciosos

A superfície dos instrumentos de laboratório, como um microscópio, pode estar contaminada com microorganismos vindos dos usuários ou da própria amostra. Por esse motivo, os pontos de contato do usuário, como as oculares, o botão de foco e o corpo do microscópio, além do teclado e mouse do computador, devem ser descontaminados regularmente.

Os agentes infecciosos podem ser classificados da seguinte forma, com diminuição da resistência aos desinfetantes (1 indica a maior resistência e 6 a mais baixa):

Esporos Bacterianos
Micobactérias
Vírus sem envelope
Fungo
Bactéria Vegetativa
Vírus Envolvidos

Os esporos bacterianos são os mais resistentes aos desinfetantes. Essas formas dormentes de bactérias são inativas e se destinam a sobreviver a condições muito difíceis e extremas. As micobactérias têm uma parede celular especial que difere de outras bactérias. Eles têm uma camada de ácidos micólicos além de sua parede celular normal, o que os torna muito resistentes. Os vírus não envelopados não têm uma bicamada lipídica circundante, em contraste com os vírus envelopados (como os coronavírus). A bicamada lipídica pode ser destruída por álcoois ou mesmo detergentes, tornando os vírus envolvidos mais fáceis de neutralizar. Bactéria vegetativa não possuem a parede celular especial dos esporos bacterianos e contêm água, o que os torna mais suscetíveis a desinfetantes. Além disso, também existem agentes proteicos infecciosos chamados príons.

Métodos de desinfecção

Os métodos de desinfecção mais eficientes contra microrganismos exploram o calor. Os exemplos são expor um material a uma chama ou vapor ou fervê-lo em água. Como não é uma boa ideia fazer isso com seu microscópio, podem ocorrer danos significativos, existem maneiras mais suaves de desinfecção.

Os instrumentos e superfícies de laboratório são geralmente limpos com líquidos contendo álcoois, aldeídos, compostos de cloro, fenóis e peróxidos . A eficiência da desinfecção de um único componente depende de sua concentração no líquido e do tempo de contato com o material. Além disso, diferentes microrganismos têm tolerâncias diversas a desinfetantes específicos. O Instituto Robert Koch subdivide desinfetantes em quatro subgrupos:

A: mata bactérias vegetativas, incluindo micobactérias, bem como fungos e seus esporos.

B: inativa vírus com e sem envelope

C: mata esporos de antraz

D: mata esporos de edema gasoso e bactérias causadoras de tétano

Lembre-se de que nem todos os componentes e materiais de seu microscópio podem resistir a produtos químicos. Por exemplo, borrachas, colas, componentes plásticos ou revestimentos de superfície de componentes ópticos podem ser adversamente afetados por certos desinfetantes.

Os álcoois (etanol, álcool isopropílico) pertencem ao grupo A dos desinfetantes mencionados acima. Eles são eficazes contra bactérias vegetativas. Sabe-se que materiais como borracha ou algum plástico podem ser afetados adversamente pelos álcoois.

Os aldeídos podem ser atribuídos aos grupos A e B. Eles são desinfetantes potentes. No entanto, os aldeídos, como o formaldeído, são prejudiciais. Além de problemas respiratórios e irritações na pele, também podem ser cancerígenos. Este é o motivo pelo qual o formaldeído, a formalina ou outros aldeídos, bem como os produtos de limpeza baseados neles, são estritamente proibidos pela Leica Microsystems e não devem ser usados.

Caso seja necessário o uso de formaldeído, o sistema deve ser totalmente coberto. A óptica do microscópio é muito sensível e precisa ser protegida contra reagentes nocivos. No caso de desinfecção completa da sala, é altamente recomendável cobrir ou desmontar essas peças e limpá-las manualmente. Para evitar danos à óptica, siga as instruções de limpeza do microscópio no manual especificado.

Os compostos de cloro são atribuídos aos grupos A e B. Eles matam bactérias vegetativas e vírus. O hipoclorito é o composto de cloro mais comumente usado para desinfecção. É também conhecido como alvejante doméstico. Para uma desinfecção eficaz, um pH de 6‐8 é o ideal e uma concentração de 0,5-1% de hipoclorito de sódio é necessária.

O peróxido de hidrogênio é um desinfetante potente. Os compostos de peróxido estão na faixa dos grupos A e B. O peróxido de hidrogênio é eficaz a partir de concentrações de 3%. No entanto, é prejudicial em concentrações mais altas e pode afetar acabamentos de metal anodizado. O peróxido de hidrogênio não funciona bem como desinfetante para componentes feitos de latão. Além disso, pode danificar as superfícies e revestimentos especiais das lentes objetivas.

Recomendações

COLOQUE SUA SEGURANÇA EM PRIMEIRO LUGAR EM TODO O MOMENTO!

Por favor, leia as Folhas de Dados de Segurança dos componentes que você planeja usar!

Todas as superfícies do sistema do microscópio (campo amplo, confocal ou estéreo) foram testadas com sucesso com soluções de peróxido de hidrogênio de até 10%, álcoois e reagentes de limpeza suaves. Para limpeza ou descontaminação, recomendamos uma desinfecção extensa com lenços umedecidos com os reagentes mencionados abaixo.

Além do desinfetante, você precisa de cotonetes (botões de lã), panos ópticos, papel para limpeza de lentes e luvas de látex . Esses itens são descartáveis e devem ser usados apenas uma vez e, em seguida, descartados.

Limpeza Regular

Pelas características acima mencionadas, recomendamos a limpeza regular com toalhetes desinfetantes à base de álcool ou lenços umedecidos com desinfetante à base de álcool. Siga as instruções e os tempos de contato do respectivo desinfetante.

Comentário: referências que foram citadas do "Centro Europeu para Prevenção e Controle de Doenças" relatam um efeito mais forte de etanol 70% contra dois coronavírus diferentes (vírus da hepatite de camundongo e vírus da gastroenterite transmissível) após 1 minuto de contato com superfícies duras quando comparado com 0,06 % hipoclorito de sódio.

Limpeza Especial

A) O cloro na forma de hipoclorito de sódio ou outros compostos liberadores de cloro é ativo contra vírus e é o desinfetante preferido para vírus HIV e hepatite. Para uma desinfecção eficaz, um pH de 6‐8 é o ideal e uma concentração de 0,5-1% de hipoclorito de sódio é necessária. A solução de hipoclorito deve estar em contato com a superfície por pelo menos 10 minutos. Em seguida, enxágue com água destilada e deixe o instrumento secar. O desinfetante químico recomendado para descontaminação eficaz de príonsé uma diluição de 1: 5 a 1:10 de hipoclorito de sódio (significando 5,25% -6,15% de hipoclorito de sódio fornecendo 10.500-12.300 ppm de cloro). A solução diluída de hipoclorito de sódio deve ser deixada por pelo menos 15 minutos em contato com a superfície a ser desinfetada. Então, novamente, enxágue com água destilada depois e deixe o instrumento secar.

A Leica Microsystems não faz nenhuma declaração quanto à adequação do hipoclorito de sódio e outros compostos liberadores de cloro usados em conexão com microscópios Leica, pois seu uso está fora das recomendações do fabricante.

B) O peróxido de hidrogênio pode ser usado com concentração de 3% para matar bactérias vegetativas, vírus e fungos. O tempo de contato com as superfícies deve ser de pelo menos 10 minutos. Em seguida, enxágue com água destilada e deixe o instrumento secar.

Alguns sistemas de microscópio têm aberturas para resfriamento de ar que não devem ser cobertas em nenhum momento. Se o ar ficar contaminado durante o uso do sistema de microscópio, o ar contaminado pode fluir para o dispositivo quando os ventiladores de resfriamento estiverem funcionando. Se uma descontaminação da sala com vaporização de peróxido de hidrogênio for planejada, os sistemas devem ser desconectados e totalmente desconectados de qualquer fonte de energia. Assim que o sistema estiver completamente desligado e sem energia, o aerossol vaporizado pode entrar no dispositivo, pois o aerossol não deve causar condensação.

Informações adicionais

Em vez de limpar o microscópio em si, há também a opção de cobrir todos os pontos de contato, propensos a contaminação, com um filme plástico antes do uso. Após o uso, esses filmes plásticos podem ser descontaminados ou trocados por outros limpos. O uso de luvas também é recomendado para evitar infecções. As luvas descartáveis podem ser descontaminadas com álcool, se necessário, ou devem ser trocadas após o uso para minimizar o risco de contaminação.

Para limpeza de componentes ópticos acessíveis , como a lente frontal das objetivas, consulte nossas informações sobre limpeza de componentes ópticos disponíveis no site da Leica ou no manual de instruções do seu microscópio.

Componentes ópticos internos e cubos de filtro em um microscópio devem ser limpos apenas por técnicos de serviço autorizados pela Leica Microsystems CMS GmbH.

Para todos os equipamentos de TI , siga também as orientações fornecidas pelo departamento de TI local.

Nunca use compostos abrasivos ou produtos de limpeza . Os compostos abrasivos podem riscar as superfícies e, portanto, ter um efeito negativo sobre o revestimento protetor das peças do microscópio.

Fontes

Isenção de responsabilidade

Este artigo informativo resume os métodos e recomendações gerais de descontaminação sem ter como objetivo substituir a experiência dos cientistas nem o conselho médico ou profissional. A Leica Microsystems não deve ser responsabilizada e não faz nenhuma representação quanto à adequação ou eficácia de qualquer método de descontaminação e / ou desinfetante mencionado neste artigo. As recomendações são baseadas nas instruções de limpeza da Leica Microsystems conforme descritas no manual do usuário e recomendações de terceiros de acordo com a lista de materiais de origem referenciada. A Leica Microsystems não se responsabiliza por quaisquer danos resultantes da higienização dos microscópios Leica fora das recomendações do fabricante, conforme escrito no manual do usuário.

Autores: Christoph Greb, Dr. ; Leica Microsystems

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